Terapia con células madre en Diabetes

Se trata de la inyección de células madre en el cuerpo donde el daño se está produciendo. A medida que estas células tienen la capacidad de transformarse en cualquier otro tipo de la célula, cura la enfermedad mediante el desarrollo y la transformación en el tipo celular necesario. Estas células nuevas y sanas reemplazan a las células dañadas, son eficientes en la reparación de las células ya tienen la capacidad de dividirse sin ninguna restricción y asumen la misma personalidad que las células dañadas. La terapia consiste en consumir células de la placenta de una mujer que acaba de dar a luz. Una vez que estas células lleguen a su órgano objetivo se producen millones de nuevas células que reparan las células dañadas y dan como resultado una vida más sana. La terapia de células madre para la diabetes se ha convertido en un rayo de esperanza y vida para los pacientes diabéticos que buscan librarse de esta enfermedad definitivamente.

http://www.medicinabuenosaires.com/revistas/vol71-11/3/vol.%2071_n3_p.%20267-273.pdf

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1561-29532004000200007

Terapia génica en Diabetes

En el caso de la diabetes, el objetivo principal de la terapia génica, es generar una fuente de células que produzcan insulina en respuesta proporcionada a los niveles de glucosa, y que puedan ser transplantados sin la necesidad de utilizar sistemas que supriman la inmunidad de los pacientes. Además, existe la perspectiva de intervenir sobre la propia respuesta inmune responsable de la destrucción de las células beta, para impedir el desarrollo de tal proceso destructivo y prevenir la enfermedad

http://www.sediabetes.org/gestor/upload/revistaAvances/AVD%2026(1).PDF#page=8

http://www.terapiagenica.es/wordpress/2008/01/27/diabetes-tipo-1/

Ejemplo de Transgénico

MODELOS ANIMALES PARA LA INVESTIGACIÓN DE PRIONES

Las encefalopatías espongiformes constituyen un grupo de enfermedades con un periodo de incubación muy largo, durante el cual la isoforma patógena PrP^res se acumula lentamente en el cerebro hasta que alcanza suficiente concentración para manifestar síntomas. Los agentes infecciosos que causan esta enfermedad se denominan priones.  Para el estudio de las mismas,  y sobre todo para determinar las relaciones etiológicas entre los PrP^res  de distintas enfermedades se recurre al empleo de modelos animales, especialmente los ratones transgénicos.

 http://revistas.ucm.es/index.php/RCCV/article/view/RCCV0909220209A/22414

Ejemplo de Genoteca

Construcción de una genoteca BAC de pino

Para poder conocer la estructura y organización de los genomas vegetales es necesario la clonación molecular de grandes fragmentos de secuencias genómicas mediante la construcción de genotecas genómicas en cromosomas artificiales de bacterias (BAC) es una de las herramientas más utilizadas. Pero cuando se trabaja con especies que presentan genomas muy grandes, como el pino, realizar este tipo de genotecas es muy laborioso y costoso. En este estudio se describe un método para, a partir de cotiledones de P. pinaster, construir genotecas BAC en grupos de células, lo que disminuye drásticamente el coste, el espacio y el tiempo requerido. La genoteca BAC consta de 83 grupos de células con una media de 4000 clones por grupo y representa por ahora un 0,8 X del genoma de P. pinaster.

http://www.bmbq.uma.es/fmp/pdfs/invagr_srf_08.pdf 

Ejemplo de ADN recombinante en la naturaleza

La recombinación genética es un proceso que lleva a la obtención de un nuevo genotipo a través del intercambio de material genético entre secuencias homólogas de DNA de dos orígenes diferentes. La información genética de dos genotipos puede ser agrupada en un nuevo genotipo mediante recombinación genética. La recombinación de eucariotas comúnmente se produce durante la meiosis como entrecruzamiento cromosómico entre los cromosomas apareados. Enzimas llamadas recombinasas catalizan las reacciones de recombinación natural. RecA, en la Escherichia coli que es responsable de la reparación de las roturas en el ADN de doble hebra. En levaduras y otros microorganismos se requieren 2 recombinasas: Proteína RAD51 para recombinación mitótica y meiótica y la proteína DMC 1 de la recombinación meiótica.

Existen varios tipos de recombinación genética en eucariotas y son :

• ·        Recombinación homóloga (profase I meiosis)
• ·        Entrecruzamiento cromosómico (anafase I meiosis)
• ·        Cambio de clase de inmunoglobulinas (IgM – IgG)
• ·        Recombinación específica de sitio (virus – bacteriófago T4 y plásmidos)
• ·        Recombinación no homologa ( células de mamíferos)

 

http://www.ivu.org/spanish/trans/ssnv-genetic.html

http://es.scribd.com/doc/70708591/Recombinacion-genetica

http://darwin.usal.es/profesores/pfmg/sefin/MI/tema10MI.html

Usos del ADN recombinante en Diabetes Mellitus

Se han realizado considerables esfuerzos para desarrollar la insulina ideal en el tratamiento de la diabetes mellitus (DM). Con los avances tecnológicos se pudo obtener insulina humana mediante ingeniería de ADN recombinante que no presenta tanta antigenicidad como sus predecesoras de origen animal.

El advenimiento de los análogos de insulina de acción ultracorta y de acción prolongada constituye un avance muy importante en la terapéutica insulínica para la diabetes, ya que se pudo mimetizar fielmente la secreción endógena de insulina. Los análogos de la insulina actualmente desarrollados y utilizados son :

• Insulina lispro 
• Insulina aspártica
• Insuline Glulisina
• Insulina NPH
• Insulina Glargina             
• Insulina Detemir
• Insulina Albulin

En los últimos años se han logrado importantes avances en las técnicas de diseño molecular y ADN recombinante. Estos análogos de la insulina se obtuvieron realizando sustituciones de aminoácidos (una o dos) en la molécula de insulina, con el objetivo de reducir las interacciones monómero – monómero.

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1561-29532006000300005

http://www.medigraphic.com/pdfs/actmed/am-2007/am073j.pdf

Mecanismos Genéticos Moleculares implicados en Diabetes Mellitus

Recientemente con la aplicación de distintas estrategias de mapeo genómico se han identificado nuevos genes de susceptibilidad para desarrollo de la  DT2. Entre los genes más importantes identificados a la fecha están el gen de la calpaina-10,

el gen TCFL2, CDKAL1, IGF2BP2, CDNKN2A/B, y el gen del transportador de zinc SLC30A8. El gen TCF7L2 codifica para un factor de transcripción del mismo nombre.

Mecanismos moleculares implicados en la homeostasis del tejido papel del eje E2F-p53 y el papel del eje E2F-p53).- Cuando los genes E2F1 y E2F2 faltan, la DNA repliega más que debe. Esta sobre-réplica daña la DNA y el camino del gen p53 está activado; es decir haciéndolo expresarse más. Ése es el punto crucial del asunto, puesto que este gen lleva a la muerte celular programada (apoptosis), y el aspecto de cambios aquí es muy perjudicial. Como el investigador explica, en este caso, “p53 es más activo, que lleva al énfasis excesivo de las proteínas implicadas en apoptosis. Ése es cuando ocurre la atrofia pancreática seguida por la diabetes.” Tan la falta de E2F1 y de E2F2 combinados con el gen p53 tiene mucho a hacer con el revelado de la diabetes pancreática, según lo confirmado en ratones.

http://www.news-medical.net/news/20120829/2446/Spanish.aspx

http://bq.unam.mx/wikidep/uploads/MensajeBioquimico/Mensaje_Bioq08v32p59_66_Tusie.pdf

Técnicas moleculares para Diabetes Mellitus (Enzimas de restricción)

 

Las enzimas de restricción son proteínas que reconocen secuencias concretas  de ADN denominadas dianas de restricción y cortan los enlaces fosfodiéster de  la doble hélice del ADN. Tienen actividad de endonucleasas. Existen varios tipos según sea el tipo de secuencia reconocida y el sitio de corte. Las que tiene una aplicación más generalizada en el diagnóstico molecular  son las de tipo II que reconocen secuencias palidrómicas de entre 4 y 8 nucleótidos  y cortan el ADN en dicha secuencia. Este punto donde la enzima encuentra la secuencia de nucleótidos se conoce como sitio de restricción.

Se utiliza para la determinación de los genotipos y polimorfismos. Se puede utilizar PCR como paso previo  para introducir sitios de enzimas de restricción.

  Las principales enzimas de restricción son:

·         ADN polimerasa

·         ADN ligasa

·         Transcriptasa inversa

·         Taq polimerasa

·         Poli nucleótido quinasa

·         Fosfatasa alcalina

Introducción. Las proteínas desacoplantes son transportadoras de aniones que desacoplan la producción de ATP de la respiración mitocondrial, causando pérdida de protones a través de la membrana mitocondrial interna y disipando la energía en forma de calor. Objetivo. Evaluar la asociación entre las variantes -3826A/G, ID 45, -2723T/A, -1957G/A, -866G/A, -55C/T de los genes de las proteínas desacoplantes 1, 2 y 3 con diabetes mellitus tipo 2. Materiales y métodos. Se tipificaron 545 casos y 449 controles para 14 variantes de los genes de las proteínas desacoplantes por medio de PCR y PCR-RFLP. Resultados. Las variantes -3826A (OR=0,78; IC95% 0,63-0,97; p=0,02), -55C (OR=1,41; IC95% 1,04-1,92; p=0,03) de las proteínas desacoplantes 1 y 3, respectivamente, y el haplotipo D45, -866G, -1957G, -2723T, -55C (OR=1,26; IC95% 1,02-1,56; p=0,03) se asociaron con diabetes tipo 2. Estas asociaciones se conservaron después de ajustar por la mezcla genética individual.Conclusión. Algunas variantes de las proteínas desacoplantes 1, 2 y 3, y sus haplotipos, confieren riesgo para diabetes mellitus tipo 2.

  

Artículo completo en : http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-41572009000100013&lng=en&nrm=iso&tlng=es

http://www.ub.edu/stat/docencia/Biologia/introbioinformatica/MicroArrays/Microarrays_de_DNA.pdf

http://es.wikipedia.org/wiki/Chip_de_ADN

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17411394

Artículo PCR (Reacción en cadena de la polimerasa) para la diabetes mellitus

En la actualidad se ha demostrado que los pacientes diabéticos poseen una gran incidencia de patologías micro y macro vasculares. En la exploración de posibles determinantes aparece como posible candidato el gen de la enzima convertidora de angiotensina (ECA), el cual presenta de acuerdo al polimorfismo inDel existente, un aumento en la concentración enzimática en sangre asociado a enfermedades vasculares. Se plantearon como objetivos establecer la prevalencia de dicho polimorfismo en pacientes diabéticos y comparar con la hallada en la población en general para poder relevar si existe asociación del locus con la diabetes mellitus.
El estudio se realizo en 131 individuos con diagnóstico certero de diabetes. Se hallaron las frecuencias génicas y genotípicas del polimorfismo InDel del gen de la ECA mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR).Finalmente no se encontraron diferencias significativas en la prevalencia del marcador estudiado entre diabéticos y la población general por lo tanto, este marcador es un factor de riesgo que no está asociado a la diabetes en sí misma, sino que la relación entre este gen y las complicaciones vasculares serían las mismas para diabéticos que para la población general.
http://www.scielo.edu.uy/scielo.php?pid=S0303-32952009000200006&script=sci_arttext&tlng=en

Consideraciones en la toma de muestra para técnicas de biología molecular en diabetes mellitus

En las últimas décadas se ha propuesto el empleo de la Biología Molecular para determinar la relación gen/enfermedad y posteriormente emplear a estos genes y sus variantes polimórficas para el desarrollo del diagnóstico molecular.

 El trabajo realizado por los investigadores alrededor del mundo ha permitido entender mejor a la DM en lo que respecta a la etiología, mecanismos fisiopatológicos y la aproximación diagnóstica y terapéutica. Con el impresionante desarrollo de la biología molecular en las últimas décadas, el panorama del conocimiento cambio radicalmente. 

El diagnóstico molecular se lleva a cabo por medio de la PCR, empleando ADN  extraído del paciente, posteriormente, se amplifica el gen candidato empleando iniciadores (primers) específicos de éste gen, el cual se le considera un marcador molecular. Un marcador molecular se define como un gen o una proteína que presenta ciertas características como:

a) participa sólo en una vía de señalización,

b) presenta polimorfismos

c) variantes génicas se expresan en cierta condición o enfermedad

Sólo por mencionar algunas características. Por ejemplo, se logró identificar genes/proteínas que participan tanto en la secreción de insulina en respuesta a una concentración de glucosa plasmática, como en la vía de señalización intracelular para la acción de esta hormona, por lo que cada uno de esos genes pudiera ser un gen candidato para considerarlo como un marcador molecular (Chiqueta y cols., 2001).

 Además, se han reportado moléculas asociadas al daño pancreático, las cuales pudieran servir como marcadores tempranos de desarrollo de la diabetes y como métodos diagnósticos más oportunos.

http://www.postgradoeinvestigacion.uadec.mx/Documentos/AQM/MARCADORES%20MOLECULARES%20PARA%20EL%20DIAGN%C3%93STICO%20TEMPRANO%20DE%20LA%20DIABETES%20MELLITUS.pdf

http://www.imbiomed.com.mx/1/1/articulos.php?method=showDetail&id_articulo=25241&id_seccion=350&id_ejemplar=2606&id_revista=23

Pruebas de tamizaje y confirmatorias de Diabetes Mellitus

Se entiende por pruebas de tamizaje aquellos exámenes aplicados con el fin de identificar una población, aparentemente sana, en mayor riesgo de tener una determinada enfermedad, que hasta ese momento no se les ha diagnosticado.                                                                                                                                       El esquema de tamizaje para DM consiste en la aplicación de dos pruebas dispuestas de manera seriada. En la primera, a través del cuestionario se explora la presencia de factores de riesgo para diabetes mellitus tipo 2 y la sintomatología de poliuria, polidipsia y polifagia y, en la segunda prueba, se miden los niveles de glucosa capilar, para finalmente -en aquellos sujetos que se consideran sospechosos de presentar la enfermedad – proceder a la confirmación diagnóstica a través de la medición de los niveles de glucosa sérica en ayuno.  Se consideran variables incluidas en el cuestionario propuesto por la ADA 7 como son edad, sexo, antecedentes familiares, para las mujeres haber tenido hijos de cuatro kilos o más, características de la actividad física y características antropométricas.

Para medir la glucemia capilar, se utilizaron glucómetros de la marca Accu-Chek modelo Sensor, con lancetas y tiras reactivas para dicho equipo. Se considera como sujeto positivo o sospechoso la glucosa capilar en ayuno es de ≥ 100mg/dL o la glucosa capilar casual es de ≥ 140mg/dL, en caso de ser inferior a estos puntos de corte el resultado de la prueba se considera negativo.                                                                                                                                               En el PADM-2 19, establece como resultado negativo o normal si la glucosa sérica en ayuno es de < 126mg/dL; y positivo o confirmado de si la glucosa sérica en ayuno alcanza valores de ≥ 126mg/Dl

Después de las pruebas de tamizaje se deben realizar pruebas diagnósticas (glucosa plasmática en ayunas (GPA) y/o una prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG)) para emitir el diagnóstico.

   

http://www.scielo.br/pdf/csp/v26n2/09.pdf

http://www.idf.org/webdata/docs/GGTD%20ES%2001%20Tamizaje%20y%20diagnostico.pdf

http://escuela.med.puc.cl/publ/boletin/patolprostata/Tamizaje.html

http://www.accu-chek.com.ec/406-La_importancia_del_buen_control_de_la_glucemia_en_diabetes.html

Diabetes Mellitus

Diabetes Mellitus

La diabetes mellitus es una enfermedad producida por una alteración del metabolismo (metabolismo es un conjunto de reacciones químicas que tienen lugar en las células del cuerpo), la causa de esta alteración es una anomalía en la producción o el funcionamiento de la insulina por el páncreas.

La insulina es una hormona que fabrica el páncreas, cuya misión es facilitar el paso de los azúcares de la sangre a las células.

Si no se trata adecuadamente, estos niveles alcanzan valores excesivamente altos, dando lugar a  la aparición de complicaciones microvasculares (enfermedad de los vasos sanguíneos finos del cuerpo, incluyendo vasos capilares) y cardiovasculares (relativo al corazón y los vasos sanguíneos) que incrementan sustancialmente los daños en otros órganos (riñones, ojos, corazón, nervios periféricos) y la mortalidad asociada con la enfermedad y reduce la calidad de vida de las personas. Existe el control pero no la curación.

http://www.geosalud.com/diabetesmellitus/diabetes.htm
http://www.fisterra.com/salud/1infoConse/diabetes_mellitus.asp#que

Dedicatoria

Este blog esta dedicado a mis padres, profesores, amigos y compañeros.

Bienvenida

Les doy las más cordial bienvenida a mi blog.

El cual ha sido creado para compartir interesantes conocimientos acerca de la Biología Molecular, al tiempo de darme la oportunidad de conocer tus ideas e inquietudes sobre los temas aquí expuestos.

Gracias por sus visitas y comentarios